BUNSEN本生為您詳解、細胞培養(yǎng)基知識大全

　　一、細胞培養(yǎng)基發(fā)展歷史

　　細胞體外培養(yǎng)初期使用的培養(yǎng)基，都是天然培養(yǎng)基，也就是組織提取物或者體液，如血漿、血清、淋巴液、胚胎浸出液等，直到20世紀50年代Parke、Eagle等人，設計出化學成分明確的合成培養(yǎng)基：MEM培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基直到現(xiàn)在還被人們廣泛使用。在此基礎上，科學家們發(fā)現(xiàn)，在合成培養(yǎng)基中添加血清，可以使細胞維持更高的活細胞密度和更長的培養(yǎng)時間。隨著血清成分的不斷明確，科學家們逐步開始研發(fā)無血清培養(yǎng)基，減少血清對細胞培養(yǎng)的影響。

　　二、細胞培養(yǎng)基組成成分及功能

　　1、氨基酸

　　氨基酸是培養(yǎng)基中主要的氮源物質，也是重要的能源物質。

　　2、維生素

　　一般培養(yǎng)基中含有的維生素有：①脂溶性維生素：如A、D、E、K等;②水溶性維生素：如B、C、葉酸、煙酰胺等。培養(yǎng)基中添加維生素可以適合更多細胞系的生長。

　　3、無機鹽

　　無機鹽是維持培養(yǎng)基滲透壓平衡的主要物質，它還可以調節(jié)細胞膜功能，無機鹽主要包括：Ca2+、Mg2+、Cl-、Na+、K+等。

　　4、碳水化合物

　　細胞培養(yǎng)基中的碳水化合物通常被用作細胞的能量來源，常用的有葡萄糖、丙酮酸鈉等。

　　5、脂類

　　脂類物質作為有機能量的來源，可以滿足細胞新陳代謝的需求，也可以支持細胞生長和存活，培養(yǎng)基中的脂類物質主要有：膽固醇、乙醇胺、亞油酸等。

　　6、激素

　　激素類物質主要包含：胰島素、生長激素、腎上腺素等，可以促進細胞生長、提高細胞增殖能力，

　　7、微量元素

　　細胞培養(yǎng)基中微量元素主要有：銅、錳、鋅、硒等，這些微量元素對細胞無蛋白長期穩(wěn)定培養(yǎng)具有重要作用。

　　8、特殊添加物

　　蛋白水解物、酵母水解物等這些特殊添加物可以起到抗氧化劑、抗剪切劑、刺激抗體表達等作用。

　　9、緩沖體系

　　通常細胞培養(yǎng)基中會添加HEPES、磷酸鹽等緩沖物質，可以調節(jié)培養(yǎng)基pH、滲透壓等。

　　三、培養(yǎng)基種類

　　1、BME細胞培養(yǎng)基：適用于各種傳代細胞系。

　　2、MEM細胞培養(yǎng)基：適合多種細胞單層生長。

　　3、DMEM細胞培養(yǎng)基：根據葡萄糖含量可以分為低糖和高糖2種類型，低糖適用于培養(yǎng)貼壁依賴性細胞，高糖適用于高密度懸浮細胞培養(yǎng)。

　　4、DMEM/F12細胞培養(yǎng)基：適用于原代細胞培養(yǎng)及難培養(yǎng)細胞。

　　5、M199細胞培養(yǎng)基：適用于培養(yǎng)多種種屬來源的細胞及能轉染的細胞。

　　6、IMDM細胞培養(yǎng)基：適用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。

　　7、RPMI-1640細胞培養(yǎng)基：適用于懸浮細胞、淋巴細胞等細胞培養(yǎng)。

　　8、HamF10細胞培養(yǎng)基：適用于克隆化培養(yǎng)。

　　9、McCoy5A細胞培養(yǎng)基：適用于原代細胞培養(yǎng)、淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)的細胞。

　　10、L15細胞培養(yǎng)基：適用于快速增殖的腫瘤細胞培養(yǎng)。

　　四、培養(yǎng)基保存方法

　　1、液體培養(yǎng)基

　　液體培養(yǎng)基應于2-8℃冰箱保存，實驗前放入37℃預熱。

　　2、干粉培養(yǎng)基

　　2-8℃冰箱避光保存。

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