BUNSEN熱訊：胎牛血清常見問題解答

　　Q: 應該如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損?

　　A:建議血清應保存在-20°C。若一次無法用完一瓶，無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?，再放回冷凍。解凍時，建議將血清從冷凍室先移至2-8°C冰箱解凍，再放置于室溫進行解凍。請注意，解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。BUNSEN不推薦將FBS在37C長時間孵育解凍，胎牛血清。

　　Q: 熱滅活是必須的嗎?

　　A:實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中局部溫度過高，搖顯不均勻，滅活時間過長，都會造成血清品質下降。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質量!

　　Q: 如何進行血清的熱滅活?胎牛血清

　　A:滅活之前必須先搖勻解凍的血清并恢復到室溫

　　(1)取部分搖勻的血清 (50ML離心管) ，選用同規(guī)格的對照管一個。;

　　(2)對照管內放入與血清等體積的水:

　　Q: 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎 ?

　　A:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應該在2周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

　　(3)溫度預試:對照管內插入溫度計，顯示56°C時，將恢復到室溫的血清，放入水浴鍋。滅活過程中，經(jīng)常輕輕晃動搖勻 (如: 每隔5MIN)，保證溫度均一。

　　Q: 細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎 ? 如何處理?

　　A:一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何

　　變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:

　　(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸:

　　(2)配制培養(yǎng)基的 PH值偏高，不宜細胞生長:

　　(3)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除

　　(4)血清等級不足以維持細胞良好的生長。

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