牛血清那些你不知道的事

　　血清的用途

　　科研實驗中，細胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細胞要養(yǎng)好，就要用好血清，如特級胎牛血清，它適合各種細胞培養(yǎng)，尤其適合難養(yǎng)細胞。

　　牛血清是一種成分復雜的混合物，其大部分成分已為人所知，但還有一部分仍不清楚，而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。

　　血清的主要成分

　　蛋白質類

　　包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉鐵蛋白(能結合鐵離子，減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;

　　多肽類

　　主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子，最主要的生長因子是血小板生長因子，還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等，雖然在血清中含量很少，但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;

　　激素類

　　激素對細胞的作用是多方面的。包括：促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸，與促細胞分裂有關;類胰島素生長因子：能與細胞表達的胰島素受體結合，從而有胰島素同樣的作用：促生長激素：促進細胞增殖的效應;血清中含有微量該成分，它可能具有促細胞貼附和增殖作用。但有人證明，血清中的氫化可的松，在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導細胞發(fā)生分化的作用。

　　其他成分

　　如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯，與蛋白相結合的微量元素對細胞生長起促進作用。

　　使用注意事項

　　血清的保存

　　在-15℃以下血清的有效期為5年，4℃可保存數(shù)周，不宜室溫保存，不宜反復凍融。配制成培養(yǎng)基后應在四周內用完，一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數(shù)量并冷凍保存。

　　血清中的絮狀沉淀物

　　血清是多種蛋白質的混合物，在凍融過程中會出現(xiàn)絮狀沉淀物，主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成培養(yǎng)基再過濾即可使用。

　　血清的解凍

　　合理的解凍方式可以更好的保護血清質量并可以在上減少絮狀沉淀物的產生。血清從低溫冰箱中取出后，經4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規(guī)則搖晃均勻融解，直至融解后再使用。

　　血清的熱滅活

　　將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統(tǒng)。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數(shù)細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞，刺激光滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究，培養(yǎng)ES細胞，昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時，建議使用熱滅活血清，在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用，甚至會因為加熱處理影響血清的質量。

　　血清中的“小黑點”現(xiàn)象

　　血清在經過一段時間的低溫凍存再融解后，在正常情況下會出現(xiàn)絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點”現(xiàn)象，認為是微生物污染。實驗發(fā)現(xiàn)血清在37℃環(huán)境放置時間過長或經過加熱滅活處理，血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要，可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。

　　注：以上資料僅供參考，不同品牌產品可能存在設計差異，操作前建議參考說明書‌。

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